对于生化试剂盒的使用你做的正确吗？看这里！

　　生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂，前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪，使用方便，缺点是稳定性较差。与单试剂相比，双试剂提高了抗干扰能力，具有稳定性能较好，可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。
 

　　生化试剂盒的操作流程如下：
 

　　(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
 

　　(2)酶标板置4℃，包被过夜。
 

　　(3)洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后，即甩去)，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
 

　　(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
 

　　(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
 

　　(6)洗板，同(4)。
 

　　(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
 

　　(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
 

　　(9)洗板，同(4)。
 

　　(10)每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
 

　　(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
 

　　(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2)，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
 

　　(13)数据处理：在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。